食药物质中赭曲霉毒素B的测定高效液相色谱法

 

 

一、 范围

本文件描述了按照传统既是食品又是中药材的物质（简称食药物质）中赭曲霉毒素B的高效液相色谱-荧光检测方法。

 

本文件适用于石斛、栀子、莲子、百合、薏苡仁、茯苓和麦芽中赭曲霉毒素B含量的测定，附录A内其余食药物质可参考执行。

 

二、 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

 

三、 原理

 

原理采用乙腈提取液提取试样中的赭曲霉毒素B，分散固相萃取方法净化，高效液相色谱-荧光检测法检测，外标法定量。

 

四、试剂和材料

 

除另有规定外，所用试剂应均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。

 

4.1试剂

 

4.1.1  乙腈（CH3CN）：色谱纯。

 

4.1.2  甲醇（CH3OH）：色谱纯。

 

4.1.3  甲酸（HCOOH）：色谱纯。

 

4.1.4  无水硫酸镁（MgSO4）。

 

4.1.5  氯化钠（NaCl）。

 

4.1.6  柠檬酸钠二水合物（C6H5Na3O7·2H2O）。

 

4.1.7  柠檬酸氢二钠盐倍半水合物（C6H9NaO8）。

 

4.1.8  石墨化碳黑（C，GCB），60~80μm。

 

4.1.9  N-丙基乙二胺（C5H14N2，PSA），40~60μm。

 

4.2盐析剂和吸附剂配比

 

4.2.1  盐析剂：无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠二水合物和柠檬酸氢二钠倍半水合物，质量比为4∶1∶1∶0.5。

 

4.2.2  吸附剂1：无水硫酸镁、石墨化碳黑和乙二胺基-N-丙基，质量比为3∶1∶1。

 

4.2.3  吸附剂2：无水硫酸镁、石墨化碳黑和乙二胺基-N-丙基，质量比为3∶1∶2。全国团体标准信息平台T/CIQA50-20232

 

4.3溶液配制

 

4.3.1  0.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸，用水稀释至1000mL，混匀。

 

4.3.2  2%甲酸乙腈溶液：取20mL甲酸，用乙腈稀释至1000mL，混匀。

 

4.3.3  乙腈-甲酸-水溶液(50：0.05：49.95，V/V/V)：量取500mL乙腈，加入0.5mL甲酸（4.1.3），用水稀释至1000mL，混匀。

 

4.4  标准品

 

  赭曲霉毒素B标准品（C20H19NO6，CAS：4825-86-9）：纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

 

4.5  标准溶液配制

 

4.5.1  标准储备液（1.0mg/mL）：准确称取一定量的赭曲霉毒素B标准品，用甲醇溶解成1mg/mL的标准储备液，-20°C下避光保存。

 

4.5.2  标准工作液（4.0μg/mL）：准确移取一定量赭曲霉毒素B标准储备液（4.5.1），用甲醇稀释成4μg/mL的标准工作液，4°C下避光保存。

 

4.5.3  基质标准工作液：准确移取一定量标准工作液（4.5.2），用基质空白溶液稀释成浓度为1、2、5、10、20、50ng/mL的基质标准工作液。

 

 

五、仪器和设备